En 2025, la chromatographie sur couche mince haute performance (HPTLC) est une technique analytique avancée qui offre une alternative rapide et économique à d’autres méthodes chromatographiques comme la chromatographie liquide haute performance (HPLC). Mais quelles sont les questions les plus fréquentes à son sujet ? Dans cet article, nous allons répondre aux 5 interrogations majeures sur cette technique en mettant en avant ses avantages et ses applications.
1. En quoi l’HPTLC est-elle différente de la TLC manuelle ?
L’HPTLC est une version améliorée de la chromatographie sur couche mince (TLC), avec plusieurs différences clés :
- Meilleure résolution : Utilisation d’une granulométrie plus fine de silice sur une faible épaisseur pour une séparation plus nette sur une distance plus courte (plaques HPTLC de 10 cm de hauteur vs plaques TLC de 20 cm de hauteur). Cette réduction de la distance permet également de réduire la consommation d’éluant et le temps d’analyse.
- Analyse automatisée : Application d’échantillons, élution, dérivatisation et détection par des appareils automatisées et pilotés par ordinateur.
- Reproductibilité accrue : Conditions entièrement standardisées pour des résultats fiables et reproductibles, comparables entre laboratoires et dans le temps.
- Densitométrie avancée : Quantification possible contrairement à la TLC classique.
En résumé : L’HPTLC offre la simplicité de la TLC, avec la précision et la rigueur d’une méthode analytique moderne.
2. Est-ce que l’HPTLC est aussi fiable que l’HPLC ?
L’HPTLC et l’HPLC sont complémentaires et non concurrentes. L’HPLC est une technique puissante pour la quantification précise de composés, mais l’HPTLC présente plusieurs avantages :
- Utilisation de détections orthogonales possibles pour confirmer l’identification d’un composé : spectre UV, derivatisations chimiques et biologiques, couplage MS.
- Analyse simultanée d’échantillons et standards (jusqu’à 20 sur une même plaque) donc dans les mêmes conditions analytiques, ce qui améliore la reproductibilité et la quantification, et apporte un gain de temps.
- Pas de risque « d’effet mémoire » ou de « carry over » d’un système HPLC puisque chaque série d’analyse utilise une plaque neuve.
- L’HPTLC permet des analyses complémentaires à l’HPLC : séparation en phase normale vs en phase inverse pour croiser les résultats. Les plaques HPTLC existent aussi avec des greffages variés à l’instar des colonnes HPLC : C18, CN, diol, NH2 etc.
- Détection non ciblée, permettant d’identifier des impuretés ou des composés inconnus. Exemple : même un composé qui ne migre pas sera visible et donc détectable.
En résumé : L’HPTLC est particulièrement utile pour les matrices complexes, les screenings rapides et la quantification de façon orthogonale à la LC.
3. Quelles sont les principales applications de l’HPTLC ?
L’HPTLC est une technique analytique polyvalente utilisée dans de nombreux secteurs pour différentes applications :
- Pharmaceutique : Contrôle qualité des médicaments, dosages d’impuretés, contrôles de nettoyages, suivis de synthèses.
- Cosmétique : Profil des extraits naturels, tests d’activités biologiques, analyse des actifs.
- Agroalimentaire : Détection de contaminants, analyse d’authenticité, caractérisation de lipides, acides aminés, sucres.
- Biotechnologies : Etude de biomolécules complexes, profils lipidiques, suivis de fermentation.
- Environnement & Forensique : Identification de stupéfiants et d’explosifs, analyse de polluants, détection de drogues et toxines.
En résumé : L’HPTLC est une technique flexible idéale pour analyser des matrices complexes où d’autres techniques chromatographiques sont limitées.
4. Peut-on quantifier en HPTLC ?
L’HPTLC permet une quantification fiable, grâce aux avancées technologiques suivantes :
- Densitométrie avec le TLC Scanner 4, qui mesure l’intensité des composés entre 190 et 900 nm.
- Analyse d’images avec le TLC Visualizer 3, qui offre une détection précise sous différentes lumières.
- Possibilité de couplage avec la spectrométrie de masse (HPTLC-MS) pour identifier et quantifier des composés à faible concentration.
À l’instar d’autres méthodes chromatographiques, la quantification en HPTLC va se faire par l’obtention de chromatogrammes : pour chaque échantillon/standard déposé, une réponse des composés sous forme de pics est restituée, avec en abscisse un Rf au lieu d’un temps de rétention. Ces chromatogrammes vont permettre le tracé d’une courbe de calibration et donc une quantification précise de nos produits.
Contrairement à d’autres techniques analytiques, où l’échantillon est détruit après l’injection, l’HPTLC permet de conserver la plaque et de répéter les analyses, ce qui améliore la fiabilité des résultats.
En résumé : L’HPTLC offre une quantification reproductible et conforme aux normes réglementaires.
5. Combien de temps faut-il pour se former en HPTLC ?
L’apprentissage de l’HPTLC est rapide et intuitif, surtout avec un accompagnement adapté. Une journée suffit pour une prise en main des équipements de base et du logiciel.
Quelques jours permettent de maitriser les aspects avancés comme le développement de méthode et la quantification.
Formation sur mesure disponible : Chromacim propose des formations adaptées au niveau des utilisateurs (débutant à expert). De plus, les instruments CAMAG sont conçus pour être conviviaux et faciles à intégrer dans un laboratoire déjà équipé d’HPLC ou d’autres techniques analytiques.
En résumé : l’HPTLC est une technique accessible qui peut être rapidement adoptée avec la bonne formation. De nombreuses ressources existent également pour apprendre et progresser sur cette technique analytique : publications sur l’HPTLC, revue bi-annuelle Camag Bibliography Service, associations de chromatographie etc.
Vous avez d’autres questions sur l’HPTLC ? Ajoutez-là en commentaire et nous y répondrons avec plaisir !
